第54届欧洲肝脏研究学会年会（EASL2019）暨国际肝脏会议（The International Liver Congress? 2019，ILC 2019）于4月10～14日在音乐之都——奥地利·维也纳隆重举行。会上，浙江大学医学院附属第一医院李君教授课题组带来了涵盖乙型肝炎相关性慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）发病机制、诊断与治疗、肝脏再生等多项临床和基础研究成果，现就相关研究内容进行报告。

 

李君教授课题组骨干在EASL/ILC2019现场

 

研究一、免疫-代谢失衡是HBV-ACLF发生发展的核心机制课题组前期通过全国13家中心的前瞻性研究，建立了适合HBV人群的ACLF诊断标准（COSSH-ACLF标准），使得约20%的患者被扩大诊断为ACLF而得到及时诊治，而基于COSSH-ACLF诊断标准的分子机制尚未阐明。

 

此次会议上，李君教授课题组报道了一项HBV-ACLF的转录组学研究。他们采用多组学交叉验证和功能关联网络分析（MOCNAS），从mRNA水平系统揭示HBV-ACLF发病及转归分子机制。

 

该研究从COSSH-ACLF样本库中随机选取包括HBV-ACLF、慢加急性肝功能失代偿（ACHD）、肝硬化（LC）、慢性乙型肝炎（CHB）和健康对照（NC）共360例样本进行转录组分析。

 

结果显示：肝硬化基础ACLF和非肝硬化基础ACLF患者的总体mRNA表达无明显差异，而ACLF组患者与ACHD、LC、CHB和NC组存在显著区分。通过差异表达结合功能分析的方法发现免疫、代谢、凝血、炎症、凋亡、肾功能损害、病毒、损伤修复等8个生物学功能与ACLF的发生、发展密切相关，首次揭示HBV激活引起的免疫代谢失衡导致的多器官衰竭是HBV-ACLF发病的关键机制，不同于欧洲CLIF-ACLF的系统性炎症反应假说机制，为建立新的治疗方法、降低 HBV-ACLF高病死率提供理论依据。

 

摘要标题：

 

Immune-metabolism disorder in progression of hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure characterized by transcriptomics（摘要编号：THU-041）研究二、人工肝支持系统可有效提高HBV-ACLF患者短期生存率ACLF患者病情危重，预后极差，内科综合治疗病死率高达50%～90%，除肝移植外无其他有效治疗方法，严重威胁人类健康。人工肝支持系统（ALSS）已被证实能改善ACLF患者的肝肾功能，但对生存率的改善没有明确定论。

 

课题组采用倾向性评分匹配（PSM）分析方法，对来自COSSH-ACLF研究队列的507例接收ALSS+标准内科治疗患者与417例单独标准内科治疗组（SMT组）患者进行系统分析。

 

结果显示，无论是否进行PSM匹配，ALSS组7、14、21、28或90d累积生存率均明显高于SMT组，尤其是ACLF-1级和ACLF-2级患者。多因素COX回归分析发现，ALSS治疗是HBV-ACLF患者短期（7/14/21/28/90d）死亡率下降的保护因素；ALSS治疗可显著改善HBV-ACLF患者ALT、AST、TB、Cr及INR等生化指标；证实ALSS可有效提高HBV-ACLF短期生存率，为ACLF患者等待肝移植提供更多宝贵时间。

 

摘要标题：

 

Artificial liver support system improves short-term survival of patients with hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure: A propensity-score matched analysis（摘要编号：THU-056）研究三、人骨髓间充质干细胞转分化肝细胞具有特征性转录谱鉴于人原代肝细胞来源受限且体外无法长期培养，由人骨髓间充质干细胞（hBMSC）诱导分化的肝细胞在体内外研究中已证实可有效治疗终末期肝病，但干细胞转分化肝细胞的具体机制尚不明确。

 

课题组利用转录组高通量测序，对hBMSC转分化肝细胞（hBMSC-Hep）进行转录谱分析，揭示了hBMSC-Hep的分子特征，发现5个可用于鉴定hBMSC-Hep的基因。

 

免疫组化染色和PCR结果显示，hBMSC-Hep表达人肝细胞特异性基因，并可分泌白蛋白、合成胶原，具有肝细胞功能。转录组数据分析发现，随着诱导分化时间的延长，hBMSC-Hep逐渐呈现肝细胞转录特征。

 

发现630个基因在hBMSC-Hep和原代肝细胞中的表达水平均高于hBMSC，这些基因与肝脏代谢、炎症免疫反应等生物学途径密切相关，其中5个基因（TDO2、HP、SERPINA3、LBP和SAA1）可作为鉴定hBMSC-Hep的标志物。

 

摘要标题：

 

Messenger RNA transcriptome profiling reveals a distinct phenotype of human bone marrow mesenchymal stem cell-derived hepatocytes（摘要编号：THU-378）研究四、DLL4在肝细胞再生和胆管修复中发挥关键作用课题组前期研究发现DLL4在hBMSC移植治疗暴发性肝衰竭猪的过程中发挥了重要作用，研究结果分别发表在Hepatology和Gut杂志，但确切机制不清。此次会议上，课题组进一步报道了DLL4通过促进hBMSC转分化为胆管上皮细胞促进肝脏再生。

 

该研究利用暴发性肝衰竭大鼠模型发现DLL4可显著改善模型动物的生化指标和存活率。通过体外过表达和低表达研究，证实DLL4可促进体外培养肝细胞的生长与生物学功能，促进hBMSC诱导分化至胆管上皮细胞。

 

该研究证实DLL4-Notch信号通路通过保护肝细胞和促进胆管细胞分化来实现肝脏的再生修复，为DLL4单分子治疗肝衰竭的临床应用奠定基础。

 

摘要标题：

 

DLL4 restores damaged liver by protecting hepatocytes and enhancing cholangiocyte differentiation（摘要编号：THU-380）